荧光定量细菌DNA硫代磷酸酯含量的简单方法

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DNA是生命体遗传信息的载体,其磷酸二酯结构曾被认为是细胞DNA中唯一的天然骨架结构,不涉及合成后修饰。然而近年来,研究发现在细菌DNA中广泛存在天然的硫代磷酸酯修饰,并且这种有趣的修饰至今仅发现存在于细菌DNA中。目前,对于DNA硫代磷酸酯修饰在细菌生命活动中的功能和意义仍然知之甚少,因此,准确定量细菌DNA中硫代磷酸酯含量对于该方面的研究非常有帮助。在本工作中,我们建立了一种简单的荧光检测方法,通过bromobimane对硫代磷酸酯的荧光标记和随后标记荧光团的碱性脱除,以避免生物活性小分子和蛋白质对检测的干扰,实现高选择性的准确定量细菌DNA中总硫代磷酸酯的含量。这种新方法相较于以往复杂的测序及色谱联用方法更为简便易操作,能准确定量细菌DNA中硫代磷酸酯含量,而不受生物样本中其他巯基活性分子干扰,可作为一种常规的简单廉价手段,用于与天然硫代磷酸化修饰的相关研究中。

原始论文:http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/biot.201500432/abstract

向宇副教授介绍:http://www.chem.tsinghua.edu.cn/publish/chem/2142/2014/20140106123059513605933/20140106123059513605933_.html